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  • 联系人:

    谭柳

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    北京 昌平区

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    试剂、耗材、实验室仪器 / 设备

  • 经营模式:

    生产厂商 代理商

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技术资料/正文

SMOBIO蛋白marker FA Q

99 人阅读发布时间:2023-01-06 09:41

SMOBIO蛋白marker FA Q
Q如何选择适合的产品?
SMOBIO 蛋白marker 分子量范围广、条带清晰锐利
技术资料图片1

PM2510符合大多数使用者需求
小分子选PM2700
大分子选PM2800
技术资料图片2


技术资料图片3


Q为何大分子条带会消失不见
跑胶缓冲液遭受蛋白酶(proteinase) 污染,buffer reuse 太多次,导致长菌以致于有proteinase 存在,或是上样时反复使用同一支 tip
技术资料图片4
                   受到污染后蛋白会从大分子开始降解
技术资料图片5

解决办法:
  1. 上样时使用避免反复使用同一支Tip。
  2. 内槽使用新鲜配置的跑胶缓冲液。


Q为何转膜后条带会歪斜或消失不见?
胶体与膜之间未完全紧贴,胶体与膜之间仍有缓冲液
模拟试验: 转膜装置未完全紧贴
技术资料图片6技术资料图片7

解决办法:
  1. 增加filter paper 张数(或厚度)à上下各三张
  2. 使用滚轮胶体与膜之间气泡或缓冲液赶走
  3. 更换新的海绵垫
技术资料图片8



Q,为何转膜后高分子條帶消失?
1. >100KDa高分子量蛋白会需要比较长的转膜时间及较高的电压
2. 缓冲液重复使用太多次或组成不正确,建议使用新鲜配制的缓冲液
3. 转膜液体可添加0.010.1SDS以促进高分子量蛋白质的转移

在正确转膜条件下,10-310kDa在转膜后都是清晰可见的状态
技术资料图片9



Q,为何小分子条带 (<5kDa) 会跑不出来?
条带在不同缓冲溶液系统、不同浓度会有不一样的分布 (如下图),
须根据需求来选择胶的浓度或挑选适合的缓冲溶液系统
若<10kDa分子分不开,建议使用MES buffer
若>100kDa分子分不开,建议使用MOPS buffer
技术资料图片10技术资料图片11


Q,为何洗膜后条带会变弱或不见
1. 洗膜液体中的Tween20浓度过高 (建议使用0.05%~1%)
2. 洗膜转速过高(建议使用25~50 rpm)
技术资料图片12
 
经过测试:
T(箭头)模糊甚至10kDa消失不见。
SMOBIO洗完后,条带依然清晰锐利。
但过高浓度的Tween 20会造成整体条带颜色变浅


 
资料格式:

SMOBIO蛋白marker FA Q.docx

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