血清知多少

血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但是由于血清成分十分复杂，直至今天，血清中的所有成分仍未完全分析出来，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而发生改变。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。


牛血清的区别

牛血清是细胞培养中重要的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养。可以划分为：胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、成牛血清。
✔ 胎牛血清（Foetal Bovine Serum，简称FBS）：胎牛血清是指怀孕3-8个月的母牛被屠宰后，发育未完全的胎牛心脏密闭穿刺采血后，通过一系列工艺处理最终获得。此时胎牛血中含有特殊的生长发育因子，一旦胚胎发育完全这些因子会自动消失。

✔ 新生牛血清（Newborn Calf Serum，简称NBCS）：出生14小时内未进食的新生牛，通常采用颈动脉采集血液分离得到的血清。

✔小牛血清(Calf serum, CS)：取自出生后3天至6个月的健康小牛，动脉采血分离血清；

✔成牛血清（Adult Bovine Serum，简称ABS）：取自健康的成年牛，收全血后分离得到血清。

胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。
某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小牛血清即可。使用浓度一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。

牛血清的保存
未拆封的牛血清，一般情况下应存放于-10℃至-20℃，在产品规定的效期内均可使用，若一次无法用完一瓶，建议无菌分装血清至合适大小的无菌离心管内，再放回冷冻。
牛血清在放入冷冻环境前，建议瓶中预留一定的体积空间，避免血清冻结后体积增大，撑破包装瓶，形成污染。

牛血清的使用
将牛血清从冷冻冰箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融，或通过水浴锅促使其溶解。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。完全溶解后建议尽快使用，若长时间储存在2-8℃，血清中的各种（脂）蛋白（如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等）可能因凝集而形成沉淀或可见的混浊。


牛血清的沉淀处理
牛血清中沉淀物的出现有许多种原因，但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成，而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后，也会存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物，并不影响血清本身的质量。若欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞您的过滤膜。
解冻牛血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃)，实验显示非常容易产生沉淀物。解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。

牛血清中的“黑胶虫”
在细胞培养的时候，有时会在400倍显微镜下看到小黑点在动，小黑点有时呈点状，有时呈小的片状，运动形式为在原地振动，类似布朗运动，这种小黑点既不是细菌、霉菌，也不是支原体，目前业内人士称其为“黑胶虫”。
黑胶虫究竟是一种生物还是非生物，本身就存在争议。黑胶虫一般是存在血清里的，而血清通常是经过0.1μm滤膜过滤的，所以血清里不可能存在细菌、霉菌及支原体等微生物。如果说黑胶虫不是生物，它会不断增多，达到一定数量时会与细胞竞争性生长，与细胞竞争培养基中的营养，从而使得细胞营养不足而死亡。